Białko hamujące fosfolipazę A2 w granulocytach obojętnochłonnych królika indukowane przez glikokortykoidy

Gdy królicze  neutrofile otrzewnowe leczono glikokortykoidami, ich odpowiedź chemotaktyczna na stymulację przez chemoatraktant fMet-Leu-Phe była znacznie zmniejszona.

Wstępna inkubacja komórek z glukokortykoidami również zmniejszyła aktywność fosfolipazy A2 (2-acylohydrolazy fosfatydowej, EC 3.1.1.4) in situ, co zmierzono przez uwalnianie kwasu [1-14C]arachidonowego, który wcześniej wbudowywał d do fosfolipidów. Moc hamująca glukokortykoidów na aktywność fosfolipazy A2 dobrze korelowała z ich działaniem przeciwzapalnym i ich zdolnością do wiązania się z receptorami glukokortykoidowymi.

Inhibitory syntezy RNA i białek tłumiły hamujący wpływ glikokortykoidów na aktywność fosfolipazy A2. Trawienie komórek traktowanych glikokortykoidem przez Pronase przezwyciężyło działanie hamujące. Traktowanie Pronazą nie miało wpływu na aktywność fosfolipazy A2 indukowaną przez jonofor Ca2+ A23187. Filtracja żelowa białek z błon neutrofili znakowanych [3H] lizyną  wykazała indukcję białka (około 40 000 daltonów) po leczeniu glikokortykoidami. Białko to hamowało częściowo oczyszczoną fosfolipazę trzustkową A2 i zmniejszało zapoczątkowaną przez peptyd odpowiedź chemotaktyczną granulocytów obojętnochłonnych.

 Zmiany miażdżycowe u królików i ludzi zawierają IgG, które rozpoznają epitopy utlenionego LDL.

Zmiany miażdżycowe zawierają stosunkowo duże ilości IgG. Wcześniej wykazaliśmy, że zarówno surowice ludzkie, jak i królicze zawierają autoprzeciwciała przeciwko epitopom utlenionej (Ox) lipoproteiny o małej gęstości (LDL) i że LDL wyizolowany ze zmian miażdżycowych zawiera niewielkie ilości ściśle związanej IgG.

Nie wiadomo jednak, czy IgG wyizolowane ze zmian miażdżycowych rozpoznaje epitopy obecne w natywnym LDL lub Ox-LDL. IgG wyizolowano z dziedzicznych hiperlipidemicznych zmian miażdżycowych królika (WHHL) Watanabe przez kolejne ekstrakcje solą, oczyszczono metodą szybkiej chromatografii cieczowej białka na białku G i zastosowano w teście radioimmunologicznym w fazie stałej.

IgG i kompleksy immunologiczne wyizolowano również z ekstraktów solankowych ludzkich zmian poprzez adsorpcję na kulkach lateksowych pokrytych przeciwciałami anty-ludzkimi IgG lub białkiem A. IgG wyizolowane ze zmian króliczych wykazywały znaczące miana przeciwko LDL modyfikowanym dialdehydem malonowym (MDA) i utlenianym przez jony miedzi przez 4 i 18 godzin, ale nie przeciwko natywnemu LDL.

Na Western blot, zmiany IgG barwiły MDA-LDL i fragmenty Ox-LDL. Western blot kompleksów immunologicznych izolowanych z ludzkich zmian chorobowych ujawnił obecność w izolowanych kompleksach zarówno fragmentów apoproteiny B, jak i apoproteiny B, które reagowały z przeciwciałami przeciwko MDA-lizynie.

Ponadto, epitopy Ox-LDL wybarwione immunologicznie IgG królika obecne w ludzkich zmianach miażdżycowych. Immunobarwienie otrzymane z IgG z króliczych zmian były podobne do tych otrzymanych z przeciwciałem monoklonalnym specyficznym dla MDA-lizyny. Wyniki pokazują, że zmiany miażdżycowe u ludzi i królików zawierają IgG, które rozpoznają epitopy charakterystyczne dla Ox-LDL. Dane te sugerują, że procesy immunologiczne mogą być ważnym elementem procesu miażdżycowego.

Funkcja nośnika w  antyhaptenowych odpowiedziach immunologicznych. I. Wzmocnienie pierwotnych i wtórnych  odpowiedzi przeciwciał przeciw haptenom  przez preimmunizację nosicielem.

Wstępna immunizacja świnek morskich lub  królików  na bydlęcą gamma globulinę (BGG) przygotowuje zwierzęta do znacznie wzmocnionych  odpowiedzi przeciwciał na 2,4-dinitrofenylo-BGG (DNP-BGG).

Zjawisko to jest obserwowane zarówno w pierwotnej  odpowiedzi przeciwciał anty – DNP  na DNP-BGG, jak i wtórnej  odpowiedzi przeciwciał anty – DNP  na DNP-BGG u zwierząt szczepionych DNP-owoalbuminą (DNP-OVA). Wstępna immunizacja BGG jest najskuteczniejsza, jeśli  antygen podaje się w postaci kompletnej emulsji adiuwantowej Freunda; u  królików dawka 1 mikrog BGG jest bardziej skuteczna niż dawka 50 mikrog, podczas gdy u świnek morskich jest odwrotnie.

Transfuzja homologicznych  surowic  anty -BGG nie zastępuje aktywnej immunizacji BGG w przygotowaniu zwierząt do tych wzmocnionych odpowiedzi przeciwciał anty -DNP  .

Zarówno klasa immunoglobulin, jak i średnia stała asocjacji dla epsilon-DNP-L- lizyna  przeciwciała  anty -DNP wytwarzanego w tych wzmocnionych odpowiedziach są określone przez tryb i czas immunizacji koniugatami haptenowymi  i nie ma na nie znaczącego wpływu charakter preimmunizacja nosiciela.

Badania te wskazują, że specyficzność anamnestycznych odpowiedzi przeciwciał swoistych dla haptenu wobec nośnika  jest w dużej mierze spowodowana interakcją dwóch niezależnych jednostek rozpoznających związanych z komórką, jednej wyspecjalizowanej w nosicielstwie, a drugiej swoistej dla determinant haptenowych.

Badania mechanizmu powstawania antygenu penicyliny. III. Grupa N-(D-alfa-benzylopenicilloil) jako determinanta antygenowa odpowiedzialna za nadwrażliwość na penicylinę G.

Nadmiar kwasu D-benzylopenicylenowego (BPE) poddano reakcji z ludzką gamma-globuliną, albuminą surowicy ludzkiej, żelatyną i poli-L- lizyną  w roztworze wodnym buforowanym o pH 7,5-8,0.

W tych warunkach BPE reagował głównie z   grupami epsilon-aminowymi lizyny białek, tworząc mieszaninę diastereoizomerów grup epsilon-N-(D-alfa-benzylopenicyloilo) -lizynowych  (Di-BPO-Lys). BPE reagował również, ale w znacznie mniejszym stopniu, z wiązaniami dwusiarczkowymi cystyny ​​ludzkiej gamma-globuliny i albuminy surowicy ludzkiej, tworząc mieszane grupy dwusiarczkowe kwas D-benzylopenicylenowy-cysteina (BPE-SS-Cys). Koniugaty zawierające dużą liczbę mieszanych grup dwusiarczkowych BPE lub D-penicylaminowych wytworzono w reakcji BPE lub D-penicylaminowej z tiolowaną ludzką gamma-globuliną w łagodnych warunkach utleniających.

Przeciwciała przeciw penicylinie  wytworzono u  królików  przez immunizację penicyliną potasową G (PG) lub wstępnie inkubowaną mieszaniną PG z normalną  surowicą królika  (PG-NRS) w kompletnym adiuwancie Freunda. Analizy specyficznego wytrącania w środowisku wodnym i żelowym (Ouchterlony), analizy PCA i specyficzne hamowanie tych reakcji za pomocą haptenów przeprowadzono na  króliczych surowicach  anty -PG i  anty- (PG-NRS), stosując powyższe koniugaty jako  antygeny .

Stwierdzono  , że przeciwciała przeciw penicylinie  są skierowane przeciwko diastereomerycznej mieszaninie grup N-(D-alfa-benzylopenicyloilowych), głównie grup Di-BPO-Lys. Za pomocą tych technik nie wykryto żadnych  przeciwciał skierowanych przeciwko grupom disiarczkowym mieszanym z BPE lub mieszanym grupom disiarczkowym D-penicylamina.

Trzech z sześciu pacjentów z historią reakcji alergicznych na PG odpowiedziało reakcjami bąbla i rumienia na grupy N-(D-alfa-benzylopenicyloilowe) (BPO) zawarte w koniugacie BPE-globulina ludzka.

Inny taki pacjent wykazywał  przeciwciała w surowicy specyficzne dla grupy BPO. Jeden pacjent leczony 25 gm dziennie PG wykazał obecność niedializowalnych  koniugatów antygenowych BPO w jego surowicy. Wyniki te pokazują, że diastereomeryczne grupy BPO (głównie grupy Di-BPO-Lys) są głównymi  determinantami antygenowymi odpowiedzialnymi za nadwrażliwość na PG u  królików  i ludzi. Omówiono możliwą przydatność kliniczną wielowartościowych koniugatów Di-BPO i jednowartościowych haptenów Di-BPO.

Immunofluorescencja wazopresyny i oksytocyny w szczurzym układzie podwzgórzowo-neurohypophypopseal.

Niniejsza praca dotyczy opracowania procedury immunofluorescencji umożliwiającej swoistą lokalizację wazopresyny i oksytocyny w układzie podwzgórzowo-neuroprzysadkowym (hnx) szczura. Przeciwciała przeciwko wazopresynie argininowej (AVP),  lizyno -wazopresynie (LVP) i oksytocynie uzyskano poprzez wstrzyknięcie  królikom tych hormonów, które były kowalencyjnie związane z tyreoglobuliną .

U królików immunizowanych wazopresyną   występowały okresy moczówki prostej, podczas gdy badanie histologiczne „hns” wykazało nienaruszony układ neurosekrecyjny z oznakami zwiększonej syntezy endogennych hormonów w jądrze nadwzrokowym i zwiększonego uwalniania w nerwowo-przysadce mózgowej niektórych  królików .

Dzienne spożycie wody przez  króliki immunizowane oksytocyną było podobne do spożycia królików  kontrolnych  . Rozwój  przeciwciał przeciwko wazopresynie, mierzony w procedurze immunofluorescencji, wykazywał przebieg znacznie odmienny od krzywej miana oznaczonej testem radioimmunologicznym (RIA). Stwierdzono również, że specyficzność  przeciwciał stosowanych w procedurze immunofluorescencji różni się znacznie od ich specyficzności w systemie RIA. Dlatego należy zbadać moc i specyficzność  przeciwciał w ramach samej procedury immunofluorescencji.

Stosując świeżo mrożone hipotalami lub przysadki utrwalone acetonem, nie można było uzyskać ostrej lokalizacji immunofluorescencji w HNS. Dlatego dokonano prefiksacji. Zarówno rodzaj, jak i czas trwania prefiksacji ujawniły zupełnie inne wyniki dotyczące immunofluorescencji w komórkach neurosekrecyjnych w podwzgórzu i ich zakończeń w neuroprzysadce.

Najlepsze wyniki immunofluorescencji uzyskano stosując 6-godzinną prefiksację glioksalem dla podwzgórza i 24-godzinną prefiksację formaliną dla przysadki. Reakcja krzyżowa  przeciwciał przeciw oksytocynie lub wazopresynie została przetestowana na syntetycznych hormonach, które były związane z kulkami agarozowymi aktywowanymi CNBR i osadzonymi na szklanych bokach. Wszystkie  anty -osocze wykazywały reakcję krzyżową na kulkach zawierających antygen  heterologiczny .

Osocze oczyszczono przez inkubację z perełkami zawierającymi hormon heterologiczny aż do usunięcia składnika reagującego krzyżowo. Stosując oczyszczone  przeciwciała zbadano dystrybucję komórek oksytocyny i wazopresyny w obrębie HNS.

Acetyl Lysine Rabbit pAb

ABD7729 Lifescience Market 100 ug 525.6 EUR

Acetyl Lysine Rabbit pAb

E2350077 EnoGene 100ul 225 EUR

Acetyl Lysine Rabbit pAb

E19-7729-1 EnoGene 50ug/50ul 145 EUR

Acetyl Lysine Rabbit pAb

E19-7729-2 EnoGene 100ug/100ul 225 EUR

Pan Methyl Lysine Rabbit pAb

E2350024 EnoGene 100ul 225 EUR

Pan Methylated Lysine Rabbit pAb

ABD7728 Lifescience Market 100 ug 525.6 EUR

Pan Methylated Lysine Rabbit pAb

E19-7728-1 EnoGene 50ug/50ul 145 EUR

Pan Methylated Lysine Rabbit pAb

E19-7728-2 EnoGene 100ug/100ul 225 EUR

Pan Mono-Methyl lysine Rabbit pAb

A18293 Abclonal 1000 μL 312 EUR

pan-Tri-Methyl lysine Rabbit pAb

A20145 Abclonal 50 μL 687.7 EUR

Rabbit anti-Acetyl Lysine Antibody

DL95561A-100ul DL Develop 100 ul 350 EUR

Rabbit anti-Acetyl Lysine Antibody

DL95561A-50ul DL Develop 50 ul 245 EUR

Rabbit anti-Methyl Lysine Antibody

DL95766A-100ul DL Develop 100 ul 350 EUR

Rabbit anti-Methyl Lysine Antibody

DL95766A-50ul DL Develop 50 ul 245 EUR

Rabbit anti-Methyl Lysine Antibody

YLD4972-100ul Shanghai YL Biotech 100 ul 320 EUR

Rabbit anti-Methyl Lysine Antibody

YLD4972-50ul Shanghai YL Biotech 50 ul 200 EUR

Rabbit anti-Acetyl Lysine Antibody

YLD0106-100ul Shanghai YL Biotech 100 ul 320 EUR

Rabbit anti-Acetyl Lysine Antibody

YLD0106-50ul Shanghai YL Biotech 50 ul 200 EUR

Rabbit Lysine ELISA kit

E04L0304-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR

Rabbit Lysine ELISA kit

E04L0304-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR

Rabbit Lysine ELISA kit

E04L0304-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR

Acetyl Lysine Rabbit Polyclonal Antibody

E12-276 EnoGene 100μg/100μl 225 EUR

Rabbit Hexanoyl lysine ELISA kit

E04H0333-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR

Rabbit Hexanoyl lysine ELISA kit

E04H0333-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR

Rabbit Hexanoyl lysine ELISA kit

E04H0333-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR

Pan Methyl Lysine rabbit polyclonal antibody

E12-219 EnoGene 100ug/100ul 255 EUR

Rabbit Carboxymethyl lysine ELISA kit

E04C0773-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR

Rabbit Carboxymethyl lysine ELISA kit

E04C0773-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR

Rabbit Carboxymethyl lysine ELISA kit

E04C0773-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR

Rabbit Carboxymethyl Lysine (Cml) ELISA Kit

SL0239Rb Sunlong - 498 EUR

Rabbit Anti-Human Lysine-specific demethylase 5B (KDM5B) IgG (aff pure)

AB-23269-A Alpha Diagnostics 100ug 578.4 EUR

Rabbit Lysine-specific demethylase 5C(KDM5C) ELISA kit

E04L0319-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR

Rabbit Lysine-specific demethylase 5C(KDM5C) ELISA kit

E04L0319-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR

Rabbit Lysine-specific demethylase 5C(KDM5C) ELISA kit

E04L0319-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR

Rabbit N lysine methyltransferase SMYD2(SMYD2) ELISA kit

E04N0575-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR

Rabbit N lysine methyltransferase SMYD2(SMYD2) ELISA kit

E04N0575-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR

Rabbit N lysine methyltransferase SMYD2(SMYD2) ELISA kit

E04N0575-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR

Rabbit Calmodulin lysine N methyltransferase(C2orf34) ELISA kit

E04C1256-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR

Rabbit Calmodulin lysine N methyltransferase(C2orf34) ELISA kit

E04C1256-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR

Rabbit Calmodulin lysine N methyltransferase(C2orf34) ELISA kit

E04C1256-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR

Anti-Acetyl Lysine antibody

STJ90135 St John's Laboratory 200 µl 236.4 EUR

Anti-Acetyl Lysine antibody

STJ97181 St John's Laboratory 200 µl 236.4 EUR

Anti-Acetyl Lysine antibody

STJ97466 St John's Laboratory 200 µl 236.4 EUR

Anti-Pan Methyl Lysine antibody

STJ97129 St John's Laboratory 200 µl 236.4 EUR

Rabbit Procollagen lysine,2 oxoglutarate 5 dioxygenase 1(PLOD1) ELISA kit

E04P0791-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR

Rabbit Procollagen lysine,2 oxoglutarate 5 dioxygenase 1(PLOD1) ELISA kit

E04P0791-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR

Rabbit Procollagen lysine,2 oxoglutarate 5 dioxygenase 1(PLOD1) ELISA kit

E04P0791-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR

Mouse anti-Acetyl Lysine Antibody

DL95440A-100ul DL Develop 100 ul 366 EUR

Mouse anti-Acetyl Lysine Antibody

DL95440A-50ul DL Develop 50 ul 256.2 EUR

Mouse anti-Methyl Lysine Antibody

DL95541A-100ul DL Develop 100 ul 366 EUR

Mouse anti-Methyl Lysine Antibody

DL95541A-50ul DL Develop 50 ul 256.2 EUR

Mouse anti-Acetyl Lysine Antibody

YLD8375-100ul Shanghai YL Biotech 100 ul 320 EUR

Mouse anti-Acetyl Lysine Antibody

YLD8375-50ul Shanghai YL Biotech 50 ul 200 EUR

Mouse anti-Methyl Lysine Antibody

YLD8516-100ul Shanghai YL Biotech 100 ul 320 EUR

Mouse anti-Methyl Lysine Antibody

YLD8516-50ul Shanghai YL Biotech 50 ul 200 EUR

Anti-Pan Methylated Lysine antibody

STJ97446 St John's Laboratory 200 µl 236.4 EUR

Methyl Lysine Antibody

20-abx134714 Abbexa
  • 427.20 EUR
  • 644.40 EUR
  • 260.40 EUR
  • 100 ul
  • 200 ul
  • 30 ul

Acetyl Lysine Antibody

20-abx134718 Abbexa
  • 427.20 EUR
  • 644.40 EUR
  • 260.40 EUR
  • 100 ul
  • 200 ul
  • 30 ul

Methyl Lysine Antibody

20-abx134721 Abbexa
  • 427.20 EUR
  • 644.40 EUR
  • 260.40 EUR
  • 100 ul
  • 200 ul
  • 30 ul

Acetyl Lysine Antibody

20-abx133817 Abbexa
  • 427.20 EUR
  • 644.40 EUR
  • 260.40 EUR
  • 100 ul
  • 200 ul
  • 30 ul

Acetyl Lysine Antibody

abx147919-100ug Abbexa 100 ug 526.8 EUR

Acetyl Lysine Antibody

20-abx330272 Abbexa
  • 376.80 EUR
  • 292.80 EUR
  • 100 ug
  • 50 ug

Acetyl Lysine Antibody

1-CSB-PA000446 Cusabio
  • 266.40 EUR
  • 234.00 EUR
  • 100ug
  • 50ug

Acetyl Lysine Antibody

20-abx159298 Abbexa
  • 326.40 EUR
  • 276.00 EUR
  • 100 ug
  • 50 ug

Acetyl Lysine Antibody

R20192-100UG NSJ Bioreagents 100ug 373.15 EUR

Acetyl Lysine Antibody

E38PA9102 EnoGene 100ul 225 EUR

Methyl Lysine Antibody

E38PA9203 EnoGene 100ul 225 EUR

Acetyl Lysine Antibody

E38PA9223 EnoGene 100ul 225 EUR

Methyl Lysine Antibody

E38PA9428 EnoGene 100ul 225 EUR

Ibuprofen Lysine

A5791-100 ApexBio 100 mg 505.2 EUR

Ibuprofen Lysine

A5791-20 ApexBio 20 mg 177.6 EUR

Ibuprofen Lysine

A5791-5.1 ApexBio 10 mM (in 1mL DMSO) 129.6 EUR

Phalloidin lysine

5304-100ug AAT Bioquest 100 ug 99 EUR

Phalloidin lysine

5305-1mg AAT Bioquest 1 mg 677 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx444251-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx444532-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

20-abx444882 Abbexa
  • 627.60 EUR
  • 410.40 EUR
  • 100 ug
  • 25 ug

Acetylated Lysine Antibody

abx448442-100ug Abbexa 100 ug 644.4 EUR

Methylated Lysine Antibody

abx448445-100ug Abbexa 100 ug 644.4 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx440038-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx440319-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx440600-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx440881-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx441162-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx441443-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx441724-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx442005-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx442848-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx443128-100ug Abbexa 100 ug 678 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx443408-100ug Abbexa 100 ug 678 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx443689-100ug Abbexa 100 ug 710.4 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx443970-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx442286-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Acetylated Lysine Antibody

abx442567-100ug Abbexa 100 ug 693.6 EUR

Recombinant human Histone-lysine N-methyltransferase, H3 lysine-36 and H4 lysine-20 specific

P2518 FN Test 100ug Ask for price

LYSINE IRON AGAR

L12-113-10kg Alphabiosciences 10 kg 1884 EUR

LYSINE IRON AGAR

L12-113-2Kg Alphabiosciences 2 Kg 456 EUR

LYSINE IRON AGAR

L12-113-500g Alphabiosciences 500 g 168 EUR

Lysine Iron Agar

MED1660 Scientific Laboratory Supplies 500G 100.8 EUR

Pan Methyl Lysine Antibody

20-abx330271 Abbexa
  • 376.80 EUR
  • 292.80 EUR
  • 100 ug
  • 50 ug

 

 

Więcej komórek zawierających oksytocynę było zlokalizowanych w części dziobowej, a więcej wazopresyny w części ogonowej zarówno jądra nadwzrokowego (SON), jak i przykomorowego (PVN). Porównywalne odsetki komórek zawierających oksytocynę i wazopresynę stwierdzono w SON i PVN. Bezwzględna ilość komórek zawierających oksytocynę była 2,5 razy większa w SON niż w PVN, co wydaje się przeczyć „klasycznemu” poglądowi, że PVN głównie lub całkowicie syntetyzuje oksytocynę. Ponadto, fluorescencję stwierdzono przy użyciu przeciwciał przeciwko wazopresynie w jądrze nadskrzyżowaniowym u szczurów Wistar i heterozygotycznych szczurów Brattleboro, ale nie w tym jądrze homozygotycznych Brattleboro.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany. Wymagane pola są oznaczone *